測定飼料中單寧的方案

引言

目前，“飼料禁抗”已成為全球畜牧業生產的趨勢，對提高畜產品質量安全、增加綠色優質畜產品供給、降低養殖生產成本、促進畜產品出口、實現畜牧業可持續發展意義深遠。單寧作為替抗產品在動物生產中的應用具有一定的可行性。

關鍵詞  單寧  分光  美析

原理

用丙酮溶液提取飼料中單寧類化合物,經過濾后,取濾液加鎢酸鈉-磷鉬酸混合溶液和碳酸鈉溶液，顯色后,以試劑為空白對照,用分光光度計于760 nm波長處測定吸光度值,用單寧酸作標準曲線測定飼料中單寧含量。

儀器及試劑

美析UV-1500紫外可見分光光度計:帶10 mm比色皿,可在760 nm處測定。

電子天平:感量為0.1mg.

粉碎機。

振蕩儀。

單標線吸管:1 mL,10 mL,50 mL,A級?？潭任?5mL。

容量瓶:50 mL,100 mL,200 mL,A級。具塞三角瓶:250 mL。

中速定量濾紙。

除非另有說明,本標準中所用試劑均為分析純,水符合GB/T 6682三級用水規定。

鎢酸鈉(Na₂O₄W·2H₂O).

磷鉬酸(H₂Mo₁₂O₄₀P·XH₂O)。

鎢酸鈉-磷鉬酸混合溶液:稱取100.0g鎢酸鈉、20.0g磷鉬酸,溶于約750 mL水中，移入1000 mL回流瓶中,加入50 mL磷酸,充分混勻,接上冷凝管,在沸水浴上加熱回流2h,冷卻,轉入1000 mL容量瓶中,用水定容至刻度﹐搖勻,過濾﹐置棕色瓶中保存。室溫下可保存14 d。

無水碳酸鈉(Na₂CO₃)。

碳酸鈉溶液(75 g/L):稱取37.5 g無水碳酸鈉，溶于250 mL溫水中,混勻,冷卻,稀釋至500 mL,過濾到儲液瓶中備用。室溫下可保存7d.

丙酮(C₃H₆O)。

丙酮溶液(1＋1,體積比):分取等體積的水和丙酮(4.6),等體積混合,搖勻,即得。

單寧酸標準品(C₇₆ H₅₂O₄₆):含量≥95.0%。

單寧酸標準儲備液:稱取單寧酸標準品適量(精確到0.0001g),加適量水溶解,用水定容至100 mL,搖勻,制成單寧酸質量濃度約為1 mg/mL的標準儲備液。在冰箱中4℃可保存5d。

單寧酸標準使用液;精密量取單寧酸標準儲備液10.00 mL,置 200 mL容量瓶中,用水定容至200 mL,搖勻。此溶液單寧酸質量濃度為50 mg/L,用時現配。